一、目的
学会植物组织中粗脂肪含量的测定方法。
二、材料用具及仪器药品
花生种子、大豆种子、索氏脂肪抽提器、电热恒温水浴锅、电吹风、滤纸、称量瓶、电子天平、20~40目筛、小粉碎机、无水乙mi(A.R.).
索氏提取器脂肪测定仪之粗脂肪的定量测定(油重法)
三、原理
脂肪不溶于水,易溶于有机溶剂,用乙mi或石油醚可将脂肪类物质提取出来。提取物中除脂肪外,还有游离脂肪酸、石蜡、磷酯、固醇、色素、有机酸等物质,总称“粗脂肪",粗脂肪的定量分析常用油重法。
四、实验步骤
1.样品制备:含油种子去壳去杂,在105℃烘箱烘干1小时,用磨碎机粉碎,过20或40目筛,装瓶备用。
2.将洗净的索氏抽提器小烧瓶编号,置105℃烘箱中烘2小时,取出,置干燥器内冷却至室温,用天平称重,并记录(W2)。
3.精密称取待测样品2g(A),装入过滤纸筒(或包),在试样面层塞以脱脂棉,以防漏散,将滤纸筒(包)放入提取管内。
4.已称重的小烧瓶内,倒入1/2~2/3体积的无水乙mi,联接索氏提取器各部分 ,在水浴上进行抽提。控制水浴温度70~80℃,以每小时回馏3~5次较宜,一般抽提8~10小时,含油量较高的可适当增加抽提时间。
5.抽提完毕,使乙mi流入小烧瓶时,取出滤纸筒(包),再回馏一次以洗涤抽提管。继续蒸馏,待抽提管内乙mi液面接近虹吸管上端而未流入小烧瓶前,倒出抽提管中乙mi。如此进行数次,直至小烧瓶中乙mi基本蒸尽,取下小烧瓶,用吹风机使残留的乙mi全部挥发。
6.将装有脂肪的小烧瓶置于105℃烘箱中烘1小时,取出置干燥器中冷至室温,称重。再烘半小时,取出冷却,再称重,直至恒重(W1);根据小烧瓶增加之重量,即可计算出样品的粗脂肪含量。